细胞培养平台
细胞室管理规章制度
中心细胞培养室是进行各种细胞培养的万级层流净化实验室,所有进入该实验室的人员都必须遵守实验室有关的规章制度,接受实验室管理人员的管理。
第一章 总则
第一条 细胞培养室对外开放,除中心相关科研技术工作人员外,其他人员如确实需使用细胞室,必须预先征得实验室负责人同意。
第二条 进入细胞室进行实验需要严格登记。如有不符合实验室工作和生物安全要求的,实验室负责人有权责令其整改。
第三条 使用人员需参加专门的细胞培养室使用规范培训并通过考核后,方可获准进入细胞培养室进行实验。严禁未经许可擅自进入细胞培养室或使用相关设备。
第四条 细胞室正常使用过程中,人员进出应通过缓冲间;进出实验室的器械和样品需通过传递窗,严禁随身带入。实验用品应尽量一次带入,严禁将与实验无关的物品带入实验室。
第五条 细胞培养室内不得进行细菌、真菌等微生物或其它易污染物的培养,禁止从事任何高危生化实验。
第六条 实验人员应爱护实验室各类仪器,按照规则使用并保持设备清洁。细胞室荧光倒置显微镜属贵重仪器,需经专门培训后方能操作,未经许可不得改变细胞室任何设备仪器的预设参数。设备仪器出现故障或发生事故,应及时向实验室负责人报告,安排专业人员进行检修。
第二章 条例
1. 穿着专用拖鞋。在准备间换下自己的鞋子。
2. 穿着专用实验服。在细胞室更衣间更换细胞室专用实验服才能进入缓冲间内,
严禁不穿实验服或直接穿着普通实验室实验服进入细胞室。
3. 尽量避免在缓冲间反复走动、停留。
4. 实验前30分钟开启空气过滤系统。
5. 中心具备2间细胞室无菌操作间,最多可容4个人同时使用。
6. 实验过程中严禁喧哗,闲聊,反复进出。
7. 实验完毕后清除杂物,清洁台面,切断电源,物品归类还原,并有清场纪录。
离开实验室前关好电、门、水。
第三章 基础细胞培养技术
项目名称 |
意义 |
方法 |
细胞计数方法 |
|
血细胞计数板、血细胞计数仪 |
细胞活力测定 |
细胞体外研究主要方法之一 |
台盼蓝法、MTT法 |
克隆形成实验 |
对于肿瘤细胞来说,克隆形成能力越高则反应其恶性程度越高。 |
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侵袭转移实验 |
1、共培养体系:A细胞接种于上室,B细胞接种于下室,研究B细胞分泌或代谢产物对A细胞的影响。
2、趋化性试验:研究B细胞对A细胞的趋化作用
3、细胞迁移试验:上室接种细胞,下室加入某种趋化因子(如生长因子),细胞向高营养的下室迁移。计数进入下室的细胞数可反映细胞的迁移能力。 |
Transwell
|
划痕愈合实验 |
研究体外细胞迁移运动能力
|
|
细胞凋亡检测 |
细胞凋亡对个体的正常发育及在病理学研究中的重要作用 |
流式细胞术 |
细胞周期测定 |
观察细胞的增殖状态及周期分布 |
流式细胞术 |
第四章 仪器设备
名称
型号规则
产地/厂家
数量
高速离心机
TGL20M
长沙迈佳森仪器设备有限公司
1
高速离心机
TG20 24*1.5ML
长沙英泰
1
倒置荧光显微镜
IX71
奥林巴斯
1
超净工作台
SJ-CJ-2D双人
苏洲苏洁净化
3
高压灭菌器
YXQ-LS-100A
上海博迅
1
80度低温冰箱
DW-HL388
中科美菱
1
医用冷藏冰箱
HYCD-205
海尔
1
荧光定量PCR仪
ABI-7500
赛默飞世尔
1
梯度PCR仪
T100
BIO-RAD
1
二氧化碳培养箱
3111
赛默飞世尔
1
PH计
STARTER3100
奥豪斯仪器
1
高速冷冻离心机
ST 16R
赛默飞世尔
1
流式细胞仪
Epics XL
贝克曼
1
全自动细胞计数仪
1
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