流式细胞术平台
中医二附院中心实验室流式细胞平台于2017年6月购入美国BD Canto Ⅱ plus 流式细胞仪。此仪器性能在贵州省同类仪器属较高水平。仪器管理人员有4年的流式细胞仪操作经验,并于2018年于华西医院完成流式细胞--血液病方向的进修学习。
流式细胞室管理规章制度
第一章 总则
第一条 流式细胞室对外开放,除中心相关科研技术工作人员外,其他人员如确实需使用,须预先征得实验室负责人同意。
第二条 进入流式细胞室需要严格登记。如有不符合实验室工作和生物安全要求的,实验室负责人有权责令整改。
第三条 使用人员需参加专门的流式细胞室使用规范培训并通过考核后,方可获准进入流式细胞室进行实验。严禁未经许可擅自进入免疫组化室或使用相关设备。
第四条 实验人员应爱护实验室各类仪器,按照规则使用并保持设备清洁。设备仪器出现故障或发生事故,应及时向实验室负责人报告,安排专业人员进行检修。
第二章 注意事项
1.实验人员需提前提供荧光试剂的说明书,样本来源说明。
2.临床标本需提前告知,并做好相应防护措施。
3.标本处理需提前询问流式细胞室负责人。如标本处理不达标,将停止上机。
第三章 数据拷贝
为避免临床数据丢失,实验人员需拷贝数据时,需使用格式化U盘。
第四章 流式科研应用
(1)细胞凋亡
细胞凋亡属于程序性正常死亡,凋亡程序以某些形态学改变为特征,包括细胞膜的损伤、细胞浆和细胞核的浓缩,细胞膜的损伤早期形态改变特征之一。利用不同细胞对染料的拒染性,可以区分正常细胞、凋亡细胞和坏死细胞。
(2)细胞周期和倍体分析
通过核酸染料标记DNA,并由流式细胞仪进行分析,可以得到细胞每个时期的分布状态,计算出G0/G1%、S%、及G2/M%。了解细胞的增殖能力。
在肿瘤病理学研究中,通过以S期细胞比率作为判断肿瘤细胞增殖状态的指标。(1)出现DNA异倍体峰可诊断阳性。(2)S期大于15% G2M大于10%可诊断为阳性。
(3)细胞因子检测
细胞因子的平衡对于人体正常生理功能的维持发挥着重要作用,细胞因子分泌的失调会导致各种疾病的发生。对细胞因子的检测是对疾病发生的根源和恶化的研究方向之一。
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